Kit tách chiết DNA từ mẫu vi khuẩn bằng hạt từ

I. Công nghệ tách chiết:

Phân giải lượng tế bào vi khuẩn ở điều kiện đặc biệt, ví dụ: độ mặn cao (hypersaline),v.v, để giải phóng DNA.

Các nhóm polymer đặc hiệu được phủ trên bề mặt các hạt từ hấp phụ DNA tự do.

Các hạt từ được thu nhận nhờ giá nam châm, nhờ đó, DNA được tách khỏi mẫu dung dịch ban đầu.

DNA được thu hồi từ bề mặt các hạt từ trong dung môi chuyên biệt và sẵn sàng cho các bước phân tích tiếp theo. 

II. Lĩnh vực ứng dụng:

Bệnh viện, Khoa xét nghiệm lâm sàng.

Trung tâm Kiểm soát Dịch bệnh (CDC).

Công ty công nghệ cao, Phòng nghiên cứu.

III. Đặc điểm:

Loại mẫu: tăm bông, dịch chiết từ tăm bông, dịch cơ thể, đờm, các mẫu cấy vi khuẩn, v.v.

Thể tích mẫu: tối đa 200µL mẫu đã tiền xử lý.

Hiệu suất tinh sạch: OD260/280 từ 1.6 - 2.0.

Hiệu suất thu nhận: ≥ 2µg (dịch nuôi cấy E.coli, OD600 = 1).

Quy trình rửa 1 bước giúp rút ngắn thời gian thao tác: chỉ 12 phút để xử lý 32 mẫu và 14 phút đối 96 mẫu.

Sản phẩm tách chiết có thể sử dụng trong PCR, DNA cloning, NGS, v.v.

Bảo quản và thời hạn sử dụng: 12 tháng ở nhiệt độ 4～30℃.

Sản phẩm tách chiết có thể được sử dụng để đánh giá các chỉ tiêu:

     1. Nhiễm trùng đường sinh sản: Streptococcus nhóm B, Candida albicans.

     2. Nhiễm trùng đường hô hấp: Staphylococcus aureus/epidermidis/pneumoniae, Klebsiella pneumoniae, Mycobacterium tuberculosis, E.coli, Acinetobacter baumanni, Pseudomonas aeruginosa.

     3. Nhiễm trùng khác: Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes.

IV. Đóng gói:

Mã hàng: BF-B

Mã hàng: BF-T

V. Hệ máy tách chiết tự động tương thích:

VI. Tiền xử lý: 

  1. Tăm bông:

     - Thêm vào mẫu tăm bông 1 mL dung dịch rửa như: dung dịch sinh lý, đệm TE, nước tinh khiết, v.v.

     - Lắc mạnh trong 5 phút, sau đó đổ dịch lỏng vào ống ly tâm 1.5 mL.

     - Ly tâm ở 13,000 vòng/phút trong 2 phút và loại bỏ 900 µL dịch nổi.

     - Thêm 100 μL Dung dịch tiền xử lý, lắc đều trong 10 giây, ly tâm ngắn (vài giây).

     - Ủ ở 90°C trong 5 phút, sau đó ly tâm ngắn lại.

2. Dịch chiết tăm bông, dịch cơ thể, mẫu cấy vi khuẩn, đờm (đã hóa lỏng):

     - Chuyển 1 mL mẫu vào ống ly tâm 1.5 mL và ly tâm ở 13,000 vòng/phút trong 2 phút.

     - Loại bỏ 900 µL dịch nổi, thêm 100 μL Dung dịch tiền xử lý, lắc đều trong 10 giây, ly tâm ngắn.

     - Ủ ở 90°C trong 5 phút, sau đó ly tâm ngắn lại.

3. Đờm (chưa hóa lỏng):

     - Chuyển 200 μL mẫu vào ống ly tâm 1.5 mL.

     - Thêm 100 μL Dung dịch tiền xử lý, lắc đều trong 10 giây, ly tâm ngắn.

     - Ủ ở 90°C trong 5 phút, sau đó ly tâm ngắn lại.

VII. Quy trình tách chiết với EXM3000/3200, TIANLONG NP968-C (áp dụng cho BF-B):

     1. Lắc dãy 6 giếng hoặc đĩa 96 giếng theo chiều úp ngược để các giọt dung dịch dính trên màng niêm phong và thành giếng rơi xuống đáy. Để yên 3-5 phút trước khi sử dụng.

     2. Cẩn thận mở màng niêm phong của dãy 6 giếng hoặc đĩa 96 giếng.

     3. Đối với dãy 6 giếng: thêm 15 µL Proteinase K và 200 µL mẫu đã tiền xử lý vào giếng số 1. Đặt dãy 6 giếng vào đế giữ theo chiều ngang, sau đó đặt đế vào máy và lắp dãy đầu hút từ tính.

     4. Đối với đĩa 96 giếng: thêm 15 µL Proteinase K vào các vị trí A1~H1 và A7~H7 theo thứ tự, sau đó thêm 200 µL mẫu đã tiền xử lý theo cùng thứ tự. Đặt đĩa 96 giếng vào vị trí tương ứng trong máy, gắn dãy đầu hút từ tính.

     5. Thiết lập chương trình theo hướng dẫn sử dụng của máy và khởi động quy trình tách chiết.

     6. Sau khi quy trình hoàn tất, chuyển sản phẩm tách chiết tại giếng số 6 (đối với dãy 6 giếng) hoặc giếng A6~H6 và A12~H12 (đối với đĩa 96 giếng) sang ống ly tâm 1.5 mL để sử dụng tiếp.

VIII. Quy trình tách chiết với EXM6000/6200 (áp dụng cho BF-T):

     1. Lắc đĩa 96 giếng theo chiều úp ngược để các giọt dung dịch dính trên màng niêm phong và thành giếng rơi xuống đáy. Để yên 3-5 phút trước khi sử dụng.

     2. Cẩn thận mở màng niêm phong của đĩa 96 giếng.

     3. Thêm 15 µL Proteinase K vào đĩa 96 giếng chứa Hóa chất tách chiết 1, sau đó lần lượt thêm 200 µL mẫu đã tiền xử lý.

     4. Đặt đĩa 96 giếng chứa Hóa chất tách chiết 1 vào vị trí số 1 trên máy.

     5. Đặt đĩa 96 giếng chứa Dung dịch hạt từ vào vị trí số 2 và gắn chắc dãy đầu hút từ tính.

     6. Đặt đĩa 96 giếng chứa Hóa chất tách chiết 2 vào vị trí số 3.

     7. Đặt đĩa 96 giếng chứa Dung dịch rửa giải vào vị trí số 5.

     8. Vị trí số 4 để trống.

     9. Thiết lập chương trình theo hướng dẫn sử dụng của máy và khởi động quy trình tách chiết.

     10. Sau khi quy trình hoàn tất, chuyển sản phẩm tách chiết trong đĩa 96 giếng tại vị trí số 5 sang ống ly tâm 1.5 mL để sử dụng tiếp.

IX. Sản phẩm liên quan:

 Máy tách chiết tự động Zybio EXM3000: https://cembio.com.vn/exm3000

 Máy tách chiết tự động Zybio EXM6000: https://cembio.com.vn/exm6000