Kit tách chiết cfDNA bằng hạt từ

I. Công nghệ tách chiết:

Trong điều kiện đặc biệt, các nhóm polymer đặc hiệu được phủ trên bề mặt các hạt từ sẽ hấp phụ các đoạn cfDNA.

Các hạt từ được thu nhận nhờ giá nam châm, nhờ đó, cfDNA được tách khỏi mẫu dung dịch ban đầu.

cfDNA được thu hồi từ bề mặt các hạt từ trong dung môi chuyên biệt và sẵn sàng cho các bước phân tích tiếp theo. 

II. Lĩnh vực ứng dụng:

Bệnh viện.

Phòng nghiên cứu.

Phòng thí nghiệm dược phẩm.

III. Đặc điểm:

Loại mẫu: huyết thanh và huyết tương người.

Thể tích mẫu: 0.5 - 10 mL

Quá trình Tiền xử lý mẫu: 20 - 40 phút.

Quá trình Tách chiết: 40 - 45 phút.

Sản phẩm tách chiết có thể sử dụng trong PCR, DNA cloning, NGS, v.v.

Bảo quản và thời hạn sử dụng:

      1. 12 tháng ở nhiệt độ 2～30℃, tránh ánh sáng và độ ẩm.

      2. 60 ngày ở nhiệt độ 2～30℃ sau khi mở bao bì.

IV. Đóng gói:

Mã hàng: CF-A

Mã hàng: CF-B

V. Hệ máy tách chiết tự động tương thích:

Mã hàng CF-B tương thích các hệ máy:

     1. Zybio EXM3000/3200: https://cembio.com.vn/exm3000

     2. TIANLONG NP968-C.

VI. Quy trình tách chiết thủ công (áp dụng cho CF-A):

     1. Lắc đều các ống dung dịch, chuyển vào ống ly tâm 15 mL các thành phần như bảng bên dưới và lắc đều trong 10 phút.

     2. Đặt ống ly tâm lên bộ tách từ 5 - 6 phút và loại bỏ dịch nổi.

     3. Thêm 1 mL Dung dịch liên kết vào ống ly tâm 15 mL, lắc đều 30 giây.

     4. Chuyển toàn bộ dung dịch vào ống ly tâm 1.5 mL, hút từ 1 phút.

     5. Chuyển dịch nổi sang ống ly tâm 15 mL trước đó để rửa thành ống.

     6. Chuyển dung dịch vào lại ống ly tâm 1.5 mL, hút từ 1 - 2 phút và loại bỏ dịch nổi.

     7. Thêm 1 mL Dung dịch rửa 1, lắc đều 15 giây, ly tâm 3 giây, hút từ 1 phút và loại bỏ dịch nổi.

     8. Thêm 1 mL Dung dịch rửa 2, lắc đều 15 giây, ly tâm 3 giây, hút từ 1 phút và loại bỏ dịch nổi. Ly tâm nhanh, hút từ 3 - 5 phút.

     9. Thêm 30 µL Dung dịch rửa giải, lắc đều 5 phút, ly tâm  3 giây, hút từ 1 phút.

     10. Chuyển dịch nổi chứa sản phẩm tách chiết sang ống ly tâm 1.5 mL mới để sử dụng cho các phân tích tiếp theo.

VII. Quy trình tách chiết với EXM3000/3200, TIANLONG NP968-C (áp dụng cho CF-B):

     1.  Lắc dãy 6 giếng hoặc đĩa 96 giếng theo chiều úp ngược để các giọt dung dịch dính trên màng niêm phong và thành giếng rơi xuống đáy. Để yên 3-5 phút trước khi sử dụng.

     2. Cẩn thận mở màng niêm phong của dãy 6 giếng hoặc đĩa 96 giếng.

     3. Đối với dãy 6 giếng: thêm 7.5 µL Dung dịch hạt từ, 250 - 500 µL mẫu, 30 µL Proteinase K vào giếng số 1 & 2. Đặt dãy 6 giếng vào đế giữ theo chiều ngang, sau đó đặt đế vào máy và lắp dãy đầu hút từ tính.

     4. Đối với đĩa 96 giếng: thêm 7.5 µL Dung dịch hạt từ, 250 - 500 µL mẫu, 30 µL Proteinase K vào các vị trí A1~H1, A2~H2, A7~H7 và A8~H8 theo thứ tự. Đặt đĩa 96 giếng vào vị trí tương ứng trong máy, gắn dãy đầu hút từ tính.

     5. Thiết lập chương trình theo hướng dẫn sử dụng của máy và khởi động quy trình tách chiết.

     6. Sau khi quy trình hoàn tất, chuyển sản phẩm tách chiết tại giếng số 6 (đối với dãy 6 giếng) hoặc giếng A6~H6 và A12~H12 (đối với đĩa 96 giếng) sang ống ly tâm 1.5 mL để sử dụng tiếp.